電泳儀是實現(xiàn)電泳分析的儀器。一般由電源、電泳槽、檢測單元等組成。所謂電泳,是指帶電粒子在電場中的運動,不同物質由于所帶電荷及分子量的不同,因此在電場中運動速度不同,據(jù)此可以對不同物質進行定性或定量分析,或將一定混合物進行組分分析或單個組分提取制備。
電泳儀的工作原理
在溶液中能吸附帶電質點或本身帶有可解離基團的物質顆粒,如蛋白質、氨基酸等,在一定的pH值條件下,于直流電場中必然會受到電性相反的電極吸引而發(fā)生移動。
不同物質的顆粒在電場中的移動速度除與其帶電狀態(tài)和電場強度有關外,還與顆粒的大小、形狀和介質黏度有關。
根據(jù)這一特征,應用電泳法便可以對不同物質進行定性或定量分析,或將一定混合物進行組分分析或單個組分提取制備,電泳儀正是基于上述原理設計制造的。
電泳儀的分類
全自動熒光/可見光雙系統(tǒng)電泳儀
具有熒光/可見光雙系統(tǒng),使用熒光試劑項目如CK、LD同工酶。優(yōu)點靈敏度、準確度高且采用高壓、低溫系統(tǒng),速度非???。
全自動醋纖膜電泳儀
為可見光單系統(tǒng),使用醋纖膜電泳片,優(yōu)點為自動化程度更高。多用于臨床常規(guī)血清蛋白電泳分析。
全自動瓊脂糖電泳儀
為可見光單系統(tǒng),使用瓊脂糖凝膠電泳膠片,優(yōu)點為靈敏度高,可用于低濃度蛋白檢驗,如尿蛋白及腦脊液蛋白,同工酶的分離效果也相當不錯,所能做項目較多且靈敏度較高。
全自動電泳分析系統(tǒng)
該電泳儀集中了上述儀器的優(yōu)點,自動點樣、電泳、呈色、烘干??捎酶鞣N電泳片,包括瓊脂片、醋酸片、聚丙烯酰胺等,采用可見光及熒光呈色雙系統(tǒng),是一種較理想的電泳儀。
電泳儀的使用方法
1、首先用導線將電泳槽的兩個電極與電泳儀的直流輸出端聯(lián)接,注意極性不要接反。
2、電泳儀電源開關調至關的位置,電壓旋鈕轉到最小,根據(jù)工作需要選擇穩(wěn)壓穩(wěn)流方式及電壓電流范圍。
3、接通電源,緩緩旋轉電壓調節(jié)鈕直到達到的所需電壓為止,設定電泳終止時間,此時電泳即開始進行。
4、工作完畢后,應將各旋鈕、開關旋至零位或關閉狀態(tài),并撥出電泳插頭。
如何選購電泳儀
1、要根據(jù)實驗要求選擇相應規(guī)格型號的電泳儀,才能確保經(jīng)濟、耐用、簡單、合理。
2、目前市面上的電泳儀電源,按電壓分為高壓1500~5000V、中壓500~1500V、低壓500V三種。
3、從電壓的角度來看,用于核酸(瓊脂糖)水平電泳、PCR電泳、DNA回收、印跡轉移等實驗只需最高電壓300V。
4、輸出的所有參數(shù)根據(jù)其型號的不同都有一個特定的工作范圍,如果實際需要超過這一范圍,就應當選擇能夠滿足使用的另外型號的電泳儀電源。
5、用戶如果需要一臺電泳儀電源帶幾個電泳槽工作時,首先要確定總電流不要超過儀器的最大范圍。
電泳儀的注意事項
1、電泳儀通電進入工作狀態(tài)后,禁止人體接觸電極、電泳物及其它可能帶電部分,也不能到電泳槽內(nèi)取放東西,如需要應先斷電,以免觸電。同時要求儀器必須有良好接地端,以防漏電。
2、儀器通電后,不要臨時增加或撥除輸出導線插頭,以防短路現(xiàn)象發(fā)生,雖然儀器內(nèi)部附設有保險絲,但短路現(xiàn)象仍有可能導致儀器損壞。
3、由于不同介質支持物的電阻值不同,電泳時所通過的電流量也不同,其泳動速度及泳至終點所需時間也不同,故不同介質支持物的電泳不要同時在同一電泳儀上進行。
4、在總電流不超過儀器額定電流時,可以多槽關聯(lián)使用,但要注意不能超載,否則容易影響儀器壽命。
5、某些特殊情況下需檢查儀器電泳輸入情況時,允許在穩(wěn)壓狀態(tài)下空載開機,但在穩(wěn)流狀態(tài)下必須先接好負載再開機,否則電壓表指針將大幅度跳動,容易造成不必要的人為機器損壞。
6、使用過程中發(fā)現(xiàn)異?,F(xiàn)象,如較大噪音、放電或異常氣味,須立即切斷電源,進行檢修,以免發(fā)生意外事故。
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