ＰＯＣ（Ｐｏｉｎｔ－ｏｆ－Ｃａｒｅ）又稱即時(shí)檢測，是ＩＶＤ行業(yè)的一個(gè)細(xì)分領(lǐng)域，指在采樣現(xiàn)場進(jìn)行的、利用便攜式分析儀器及配套試劑快速得到檢測結(jié)果的一種檢測方式。

ＰＯＣＴ技術(shù)最早始于２０世紀(jì)中期，由Ｅｄｍｏｎｄｓ以干化學(xué)制片測量血糖及尿糖，隨后由Ａｍｅｓ公司將其檢測項(xiàng)目擴(kuò)大并商業(yè)化。由于方法簡便快速而得到普遍應(yīng)用。近２０年來，ＰＯＣ檢測的發(fā)展在全球范圍內(nèi)是肉眼可見的速度在突飛猛進(jìn)。

中國自２０１５年ＰＯＣＴ第一股上市開始，以每年超過２０％的速度快速增長，預(yù)計(jì)２０２７年整體市場超過２６０億元，遠(yuǎn)超全球ＰＯＣＴ行業(yè)７．４％的發(fā)展速度，已經(jīng)是我國ＩＶＤ行業(yè)增長最快的細(xì)分領(lǐng)域之一。

來源：前瞻產(chǎn)業(yè)研究院

為了更好的理解ＰＯＣ檢測，為其技術(shù)的發(fā)展指明方向，已有幾個(gè)標(biāo)準(zhǔn)來評估ＰＯＣ檢測的適用性。其中包括ＷＨＯ的ＡＳＳＵＲＥＤ標(biāo)準(zhǔn)，ＦＤＡ的ＣＬＩＡ標(biāo)準(zhǔn)，以及在新冠之后提出的ＳＴＡＲＬＩＴＥ標(biāo)準(zhǔn)。

在新冠疫情期間，ＰＯＣＴ通過實(shí)際場景的應(yīng)用自證了其技術(shù)的成熟性和可靠性，尤其是分子ＰＯＣＴ檢測技術(shù)的廣泛運(yùn)用。

等溫?cái)U(kuò)增（如ＨＣＡ、ＭＤＡ、ＮＡＳＢＡ和ＬＡＭＰ等）在分子ＰＯＣ診斷中發(fā)揮了越來越重要的作用。等溫?cái)U(kuò)增具有與ｑＰＣＲ相似的靈敏度和特異性，但是在快速、低成本和便攜性方面具有優(yōu)勢，因此成為在資源有限環(huán)境下使用ＰＯＣ檢測的理想選擇。

近幾年來，等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)的進(jìn)步，尤其是在實(shí)時(shí)檢測、多重?cái)U(kuò)增和基于芯片的檢測方面的發(fā)展，提高了等溫?cái)U(kuò)增的靈敏度和準(zhǔn)確性，可以說是徹底改變了ＰＯＣ行業(yè)，為更快、更方便的診斷鋪平了道路。

在多種等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)中，ＬＡＭＰ是最常用的方法，它可實(shí)現(xiàn)在恒定溫度（６０－６５oＣ）下對ＤＮＡ或ＲＮＡ靶標(biāo)進(jìn)行高效、特異和快速擴(kuò)增。在相同時(shí)間內(nèi)，ＬＡＭＰ擴(kuò)增　效率比傳統(tǒng)?。校茫腋撸保埃氨?。不過，ＬＡＭＰ技術(shù)也有一些限制，例如具有較高假陽性率，引物設(shè)計(jì)復(fù)雜、重復(fù)性不太好。

另一種等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)，基于核酸序列的擴(kuò)增（Ｎｕｃｌｅｉｃ?。幔悖椋洹。螅澹瘢酰澹睿悖濉。猓幔螅澹洹。幔恚穑欤椋妫椋悖幔簦椋铮?，ＮＡＳＢＡ）也越來越受歡迎，它的核心優(yōu)勢是能在更低的溫度下（～４１°Ｃ）下直接擴(kuò)增ＲＮＡ，只需要使用２個(gè)特異性引物Ｐ１／２，因此在引物設(shè)計(jì)方面就沒那么復(fù)雜，更容易優(yōu)化。

與使用Ｂｓｔ酶鏈置換活性的ＬＡＭＰ擴(kuò)增不同，ＮＡＳＢＡ擴(kuò)增是依賴ＡＭＶ逆轉(zhuǎn)錄酶、ＲＮａｓｅ?。群褪删wＴ７　ＲＮＡ聚合酶活性進(jìn)行的反應(yīng)。

其兩個(gè)特異性引物與目標(biāo)ＲＮＡ序列雜交，并通過逆轉(zhuǎn)錄酶生成ＤＮＡ的互補(bǔ)鏈（ｃＤＮＡ），然后將其作為模板合成多個(gè)ＲＮＡ副本。新的ＲＮＡ鏈和ｃＤＮＡ模板通過變性和再變性分離并重新連接。這一過程在反轉(zhuǎn)錄（產(chǎn)生更多的ｃＤＮＡ）、ＲＮＡ合成和指數(shù)級(jí)ＲＮＡ擴(kuò)增的循環(huán)中重復(fù)進(jìn)行，可在９０分鐘內(nèi)將目標(biāo)片段擴(kuò)增１０１２倍以上。

ＮＡＳＢＡ反應(yīng)的反轉(zhuǎn)錄過程被直接合并到擴(kuò)增反應(yīng)中，因此該技術(shù)最適合分析ＲＮＡ樣品。樣品中ＤＮＡ、肝素、檸檬酸鹽、血紅蛋白、白蛋白和脂質(zhì)等的污染將不會(huì)對結(jié)果造成影響，因而適用于可能不適合其他試驗(yàn)檢測的樣品。且反應(yīng)溫度較低，因此是細(xì)菌、病毒等多種病原微生物ＰＯＣ診斷的理想選擇。